ES & iPS 細胞培養サプリメント
堅牢な培地を調製する際の課題
ヒト胚性幹細胞(hES)およびヒト人工多能性幹細胞(hiPS)の技術進化により、再生医療、創薬、ライフサイエンス研究に多大な進歩がありました。
現在の細胞培養研究室では、市販ESまたはiPS培地は個別の研究プロジェクトに合うようしばしば組成の微調整が必要になります。しかし、販売業者からカスタム培地を調達するには、しばしば培地製造業者と長い交渉が必要となります。
所内でhESまたはhiPS培地を調製する場合はどうでしょうか。選択肢の一つは、Essential 8培地(E8)から始めることです。そのレシピは2005年に公開されましたので(参考文献1)、それに従って組成を調整することができます。
E8培地の大きな問題は、細胞にストレスがかかる状況での堅牢性です。例えば、単一細胞クローニング、患者由来iPS、CRISPR-Cas9遺伝子編集などの用途では収量が低くなる場合があります。
いくつかの成長因子や化学物質をサプリメントで添加してE8培地の性能を増強することができ、そのほとんどは遺伝子組み換え高純度で入手可能です。
アルブミンの有効性
近年、アルブミンを含有する高度なES/iPS培養培地が数種類登場し(参考文献2)、アルブミン非含有のEssential 8 と比較してこれら製品で考えられるアルブミンの機序も報告されています(参考文献3)。
細胞培養サプリメントの性能は明確に特性化されていることが多いですが、アルブミンはそうでないことが多いです。アルブミンはもともと血漿分画工程副産物であったこと、および他の血漿分子にくっつきやすいことから、長らくロット間ばらつきを制御できないと考えられてきました。
組成を規定し性能を引き出す
当社は業界主導企業と連携して遺伝子組み換えアルブミン調製 deAlbumin™ を作成しました。これは、アルブミンに付いてくる小分子をすべて排除し、それら小分子の規定レシピにより再会合したものです。deAlbumin™ はE8培地におけるiPS の生細胞数を45%増大させます。